توضیحات
توصیف محصول
کلاژناز (بدست آمده از کلستریدیوم هسیتولیتیکوم) یک آنزیم پروتئاز است که برای پیوند بین یک اسید آمینه خنثی (X) و گلیسین در توالی پرولین-X-گلیسین-پرولین اختصاصیت دارد. این توالی به کرات در کلاژن تکرار شده است و در بین پروتئازها از این نظر منحصر به فرد است که می تواند فیبریل های کلاژن طبیعی مارپیچ سه گانه (که بطور شایع در بافت یپوندی یافت می شود) را تخریب کند. کلاژناز خام معمولا حاوی کلستریدیوپپتیداز A و تعدادی از آنزیم های پروتئاز، پلی ساکاریداز و لیپاز بوده و بطور شایع برای تجزیه بافتی بکار می رود. این آنزیم خام برای تجزیه بافت ایده آل است زیرا علاوه بر داشتن آنزیم مورد نیاز برای تخریب کلاژن طبیعی و فیبرهای شبکه ای، حاوی آنزیم هایی است که سایر پروتئین ها، پلی ساکاریدها و لیپیدهای موجود در ماتریکس خارج سلولی بافت های پیوندی و اپیتلیال را هیدرولیز می کند.
پتانسی
یک واحد آنزیم، معادل یک میلی مول لوسین را ظرف 5 ساعت در 37 درجه سانتیگراد با pH 7.5 از کلاژن آزاد می کند. فعالیت محصول کلاژناز نوع 4 بالاتر از 160 واحد بر میلی گرم باشد.
روش استفاده
-
آماده سازی محلول استوک و محلول کاری
-
آنزیم لیوفیلیزه غیراستریل را در HBSS (حاوی کلسیم و منیزیم) یا PBS (حاوی کلسیم و منیزیم) یا DMEM/F12 حل کنید. محلول را توسط فیلتراسیون مخصوص کشت سلول استریل کنید. کلاژناز خام اغلب در غلظت های 1/0 تا 5/0 درصد (W / V) یا 50 تا 100 واحد بر میلی لیتر استفاده کنید. بلافاصله پس از تهیه، محلول را استفاده کنید یا در فریزر قرار دهید. بلافاصله قبل از استفاده، آن را در دمای یخجال ذوب کنید.
-
-
تجزیه بافت
-
بافت را با استفاده از یک اسکالپل یا قیچی استریل تکه تکه کنید.
-
بافت را چندین بار در HBSS بشویید.
-
قطعات بافت در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار دهید. با استفاده از یک سکوی غلتان و اضافه کردن CaCl2 3 میلی مولار، کارایی فرایند را افزایش دهید.
-
-
انتشار در ارگان
-
دایجست را تا 37 درجه سانتیگراد گرم کنید و انتشار در بافت در یک سرعت بهینه شده از قبل، برای ارگان مورد نظر انجام دهید. افزودن CaCl2 3 میلی مولار کارایی فرایند تجزیه را افزایش می دهد.
-
سلول های پراکنده و قطعات بافت با عبور دادن مخلوط از یک فولاد استریل زنگ نزن یا یک شبکه نایلونی، از قطعات بزرگتر جدا کنید. در صورتیکه نیاز به تجزیه بیشتر، می توان محلول کلاژناز تازه به قطعات اضافه کرد.
-
برا ی حذف دبری ها و محلول آنزیم، چندین بار شستشو انجام دهید. یک مرحله جداسازی دانسیته (نایکودنس) باعث ایجاد یک سوسپانسیون شفاف تر خواهد شد.
-
رسوب را در محیط کشت سوسپانسه و در شرایط تعیین شده از قبل انکوبه کنید.
-
نکات
-
در دمای 8-2 درجه سانتیگراد (5- تا 20- درجه سانتیگراد پس از آماده سازی) نگهداری کنید.
-
از رطوبت و تماس با نور پرهیز کنید.
-
از استنشاق و تماس با پوست اجتناب کنید.
-
فقط برای مقاصد تحقیقاتی استفاده شود. برای مقاصد تشخیصی یا درمانی در انسان یا حیوان مناسب نیست.
-
در مقایسه با سایر پرپوراسیون های کلاژناز، کلاژناز نوع 1 دارای سطوح متوسط فعالیت های کلاژناز، کازئیناز، کلوستریپاین، و تریپتیک است و به خوبی برای تجزیه بافت چربی، آدرنال، کبد، و اپی تلیال بهینه شده است. It is well-suited for digestion of pancreas islet cells, Mammary IV Islet (insulin receptor sites).
-
عوامل شلاته کننده فلزات مانند سیستیئن، EDTA، و گونه فعال اکسیژن باعث مهار آن می شوند.
آماده ارسال در 1-2 هفته از ایران
Bioidea-Alpha-MEM (With HEPES)100ml
محیط کشت MEM Alpha (Minimum Essential Medium) فرمولاسیون بسیار پیچیده ای با حضور اسیدهای آمینه، ویتامین ها، اسید لیپوئیک و پیروات است. برای افزایش کارایی، ریبونوکلئوتیدها و داکسی ریبونوکلئوتیدها به این محیط کشت اضافه شده است. این محیط برای رشد طیف وسیعی از سلول های شناور و چسبنده انسان از قبیل کراتینوسیت ها، آستروسیت های اولیه موش و سلول های ملانومای انسان بکار می رود. همچنین، محیط Alpha MEM برای رشد و تکثیر سلول های مغز استخوان و سلول های آمنیوتیک…
Bioidea-DMEM (Low Glucose,Glutamax)-500ml
محیط کشت (Dulbecco’s modified Eagle’s medium) DMEM یکی از پرکاربردترین محیط کشت های تغییر یافته از محیط Eagle است که مقدار ویتامین ها و اسید های آمینه آن نسبت به محیط کشت پایه تقریبا چهار برابر و مقدار گلوکز آن به دو برابر افزایش یافته است. محیط کشت DMEM برای کشت اکثر انواع سلولها از قبیل سلول های انسان، موش، هامستر، میمون، جوجه و ماهی مناسب است. مقدار پایه گلوکز در محیط کشت 1 گرم در لیتر و در محیط کشت DMEM حاوی گلوکز بالا، 5/4 گرم در لیتر است. در انواع مختلف محیط های کشت DMEM، HEPES 15 میلی مولار، گلوتامین، گلوتامکس، پیروات و سدیم بیکربنات وجود دارد …
Bioidea-Alpha-MEM (With HEPES)500ml
محیط کشت MEM Alpha (Minimum Essential Medium) فرمولاسیون بسیار پیچیده ای با حضور اسیدهای آمینه، ویتامین ها، اسید لیپوئیک و پیروات است. برای افزایش کارایی، ریبونوکلئوتیدها و داکسی ریبونوکلئوتیدها به این محیط کشت اضافه شده است. این محیط برای رشد طیف وسیعی از سلول های شناور و چسبنده انسان از قبیل کراتینوسیت ها، آستروسیت های اولیه موش و سلول های ملانومای انسان بکار می رود. همچنین، محیط Alpha MEM برای رشد و تکثیر سلول های مغز استخوان و سلول های آمنیوتیک…
درخواست محصول
.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه(نظر) ارسال کنند.
محصولات پیشنهادی
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.